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第一部分 病毒学实验3

第一章 病毒的提纯及浓度测定3

实验一 植物病毒的提纯3

实验二 紫外分光光度法测定提纯病毒的浓度11

实验三 动物病毒的提纯和感染单位测定15

第二章 病毒的形态学观察20

实验四 负染法观察提纯的病毒23

实验五 免疫电镜法检测发病叶片中的病毒24

实验六 超薄切片法观察组织中的病毒及细胞病理学变化26

实验七 免疫胶体金检测细胞中病毒的分布28

第三章 RNA病毒侵染性cDNA克隆的构建33

实验八 烟草花叶病毒侵染性cDNA克隆的构建33

实验九 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性cDNA克隆的构建42

实验十 单引物扩增技术获得病毒基因组全序列49

第四章 病毒的分子生物学检测技术57

实验十一 RT-PCR检测植物叶片中的特定病毒62

实验十二 病毒的斑点杂交检测67

实验十三 病毒的Northern blotting检测技术71

实验十四 病毒的实时荧光定量PCR检测75

实验十五 反转录环介导的等温扩增技术检测病毒86

第五章 病毒的血清学检测技术94

实验十六 植物病毒抗血清效价的测定96

实验十七 琼脂双扩散反应检测植物病毒98

第二部分 免疫学实验103

第六章 实验动物103

实验动物简介103

实验十八 实验动物采血方法114

实验十九 实验动物免疫方法116

实验二十 常用免疫学实验动物模型的建立120

第七章 细胞培养技术133

实验二十一 细胞的传代与细胞计数136

实验二十二 细胞的冻存与复苏139

实验二十三 树突细胞的诱导及培养142

第八章 抗体制备及检测技术144

实验二十四 兔抗血清制备144

实验二十五 单克隆抗体的制备146

实验二十六 抗体的纯化153

实验二十七 血凝和血凝抑制实验154

实验二十八 酶联免疫吸附实验156

实验二十九 免疫电泳实验159

实验三十 蛋白免疫印迹实验162

实验三十一 免疫组织化学实验164

实验三十二 细胞免疫荧光实验167

第九章 补体实验170

实验三十三 补体与补体单位的滴定实验170

实验三十四 溶血素制备与补体参与的溶血反应172

实验三十五 补体介导的细胞毒实验175

第十章 淋巴细胞分离纯化177

实验三十六 制备免疫细胞悬液177

实验三十七 密度梯度离心法分离外周血液中的白细胞181

实验三十八 脾脏不同免疫细胞磁珠分选实验183

第十一章 免疫细胞荧光染色流式细胞仪检测188

实验三十九 免疫细胞表面分子检测188

实验四十 胞内细胞因子表达检测192

实验四十一 Annexin V/PI双荧光染色检测细胞凋亡194

第十二章 免疫细胞功能实验197

实验四十二 淋巴细胞转化实验197

实验四十三 混合淋巴细胞反应199

实验四十四 T细胞增殖实验——MTT法201

实验四十五 T细胞增殖实验——3H-TdR掺入法204

实验四十六 T细胞增殖实验——CFSE染色法206

实验四十七 体外CTL实验208

实验四十八 体内CTL实验211

实验四十九 酶联免疫斑点实验214

实验五十 B细胞增殖实验216

实验五十一 B细胞溶血空斑实验218

实验五十二 NK细胞杀伤活性实验——乳酸脱氢酶释放法220

实验五十三 NK细胞杀伤活性检测——MTT比色法222

实验五十四 NK细胞杀伤活性实验——51 Cr释放法223

附录一 常用血液抗凝剂的配制及用法226

附录二 常用消毒液的配制及用途228

附录三 常用试剂和溶液的配制229