组织和细胞培养技术 第3版【2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载】

组织和细胞培养技术 第3版PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

第一章 绪论1

第一节 组织培养的诞生与发展简史1

第二节 组织培养的优点、局限性及发展方向4

一、组织培养的优点4

二、组织培养的局限性4

三、组织培养的可能发展方向5

第三节 组织培养常用术语5

第四节 组织培养常用缩写词8

第二章 细胞培养的基本条件12

第一节 细胞培养实验室的建立12

一、实验室设计原则与要求12

二、实验室的布局13

三、细胞培养实验室的基本设备14

第二节 培养仪器和材料17

一、常用仪器设备17

二、培养器皿与其他材料20

三、培养用品的清洗和消毒22

第三节 培养用液29

一、培养基29

二、其他培养用液42

三、细胞培养所用液体的灭菌与保存44

第三章 细胞培养的基本技术48

第一节 显微镜观察48

一、相差显微镜48

二、微分干涉差显微镜技术49

三、荧光显微镜50

四、激光共聚焦扫描显微镜52

五、电子显微镜53

第二节 流式细胞仪技术55

第四章 体外培养的基本组织59

第一节 上皮组织59

一、内皮细胞的培养59

二、单层柱状上皮细胞的培养63

三、假复层纤毛柱状上皮细胞的培养65

四、复层扁平上皮细胞的培养66

第二节 结缔组织68

一、成纤维细胞的培养68

二、巨噬细胞的培养69

三、脂肪细胞的培养70

四、肥大细胞的培养71

五、血细胞的培养73

六、淋巴细胞的培养75

七、软骨细胞的培养76

八、骨细胞的培养77

第三节 肌组织78

一、心肌细胞的培养78

二、平滑肌细胞的培养79

三、骨骼肌细胞的培养80

第四节 神经组织81

一、神经元的培养81

二、神经胶质细胞的培养82

第五节 细胞运动的观察83

一、噬动轨迹法83

二、细胞刮除法84

三、细胞培养池法84

四、数字影像法85

第六节 细胞培养的生长测定85

一、细胞计数法85

二、台盼蓝染色法86

三、MTT比色法86

四、细胞生长曲线法87

五、［3H］-TdR掺入法87

六、BrdU掺入法88

第七节 细胞的冻存、复苏和运输89

一、细胞的冻存89

二、细胞的复苏89

三、细胞的运输90

第五章 细胞系的建立和鉴定91

第一节 正常细胞系的建立和鉴定91

一、正常细胞系建立92

二、正常细胞系建立的例证95

三、建立正常细胞系的讨论和小结96

四、正常细胞系的鉴定97

五、正常细胞系鉴定讨论及小结101

第二节 癌细胞系、转化细胞系的建立和鉴定101

一、癌细胞系的建立101

二、癌细胞建系的例证103

三、转化细胞系建立104

四、癌细胞和转化细胞建系讨论和小结105

五、癌细胞系和转化细胞系的鉴定105

六、癌细胞和转化细胞系建立和鉴定的小结和讨论109

第六章 细胞周期分析与细胞克隆化技术111

第一节 细胞周期概述111

第二节 细胞周期调控111

第三节 细胞同步化方法113

一、使细胞同步化在G0/G1期方法114

二、使细胞同步化在G1期114

三、使细胞同步化在G1/S期交界点115

四、使细胞同步化在有丝分裂期（M期）115

第四节 细胞周期分析115

一、流式细胞仪分析细胞周期115

二、3H-TdR掺入DNA法116

三、PCNA法116

四、测定细胞周期的其他方法116

第五节 细胞克隆的概念及培养方法118

一、细胞克隆的基本概念118

二、细胞克隆的培养方法118

第七章 器官培养120

第一节 器官培养的要求120

一、器官培养的取材120

二、培养基121

三、培养环境中的气体121

四、培养器官的支持物121

第二节 器官培养技术的特点122

一、优点122

二、不足122

第三节 器官培养的方法122

一、固体培养基器官培养法122

二、液体培养基器官培养法123

三、动态器官培养法126

四、体内器官培养法127

第四节 器官培养的应用129

一、器官培养在胚胎发育研究中的应用129

二、器官培养在器官功能及其代谢研究中应用132

三、器官培养在肿瘤侵袭研究中的应用135

第八章 干细胞的培养138

第一节 胚胎干细胞138

一、胚胎干细胞的培养139

二、胚胎干细胞的形态特征及其鉴定143

第二节 神经干细胞144

一、神经干细胞的概念及生物学特征144

二、神经干细胞的分离与培养144

第三节 造血干细胞147

一、造血干细胞的定义及生物学特征147

二、造血干细胞的分离及培养147

第四节 间充质干细胞148

一、从骨髓细胞中分离MSC细胞148

二、流式细胞仪分离鉴定MSC148

三、MSCs克隆形成试验149

四、人的MSC细胞系培养149

五、MSC细胞向脂肪细胞谱系分化149

六、MSC诱导分化为软骨细胞—软骨细胞团试验150

七、MSC诱导分化为成骨细胞谱系150

八、不同组织来源的MSC的特殊表面标志151

第五节 表皮组织干细胞151

一、移植人皮肤培养表皮干细胞152

二、角质形成细胞的鉴定152

第六节 胰岛干细胞152

一、人胰腺导管制备胰岛干细胞153

二、从小鼠胚胎干细胞系定向诱导分化为胰岛干细胞153

第七节 鉴定干细胞及分化细胞类型的标志153

第八节 体细胞重编程为多能干细胞157

一、细胞培养157

二、质粒构建158

三、慢病毒制备及感染158

四、4种转录因子的反转录病毒感染人成纤维细胞诱导产生iPS细胞158

五、人iPS细胞的鉴定158

第九章 细胞培养在细胞分化研究中的应用162

第一节 细胞分化概念162

一、细胞分化的特征162

二、细胞分化的调控163

三、细胞分化的分子机制164

四、细胞分化的调控障碍与疾病164

第二节 正常细胞的分化研究166

一、正常细胞分化研究简况166

二、ES和EG细胞培养和建系的基本技术166

三、ES细胞体外诱导分化169

四、诱导分化细胞的永生化171

五、小鼠骨髓和脾来源树突状细胞的分离与扩增培养172

第三节 癌细胞分化研究173

一、癌细胞分化研究的简况173

二、癌细胞分化研究174

三、癌细胞分化研究几种常用的检测技术179

第十章 细胞培养在细胞衰老、凋亡研究中的应用182

第一节 细胞凋亡的常用研究方法182

一、细胞凋亡的形态学研究方法182

二、细胞凋亡的生物化学研究方法184

三、细胞凋亡的免疫化学分析方法188

四、细胞凋亡的分子生物学研究方法189

五、细胞凋亡时Ca2+浓度测定191

第二节 抗凋亡研究192

一、bcl-2基因的抗凋亡作用192

二、细胞抗凋亡的信号转导通路193

第三节 细胞衰老的常用研究方法194

一、衰老相关β-半乳糖苷酶活性检测194

二、端粒长度的测定194

三、错配修复基因的测定196

四、微卫星不稳定性的测定196

第十一章 细胞融合与单克隆抗体制备198

第一节 单克隆抗体制备的基本原理199

第二节 小鼠-小鼠B淋巴细胞杂交瘤200

一、融合用细胞的制备200

二、细胞融合203

三、杂交瘤细胞的选择培养204

四、特异抗体的检测205

五、杂交瘤细胞的克隆化206

六、杂交瘤细胞的冻存207

七、单克隆抗体的大量制备207

八、单克隆抗体Ig类型的鉴定208

九、小鼠单克隆抗体的纯化208

第三节 人－人淋巴细胞杂交瘤与人-鼠杂交瘤细胞210

一、人－人淋巴细胞杂交瘤技术210

二、人－小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术211

第四节 大鼠－大鼠B淋巴细胞杂交瘤211

一、大鼠骨髓瘤细胞系212

二、大鼠B淋巴细胞的制备212

三、细胞融合212

四、大鼠单克隆抗体的生产212

五、大鼠单克隆抗体的提纯212

第五节 基因工程抗体212

一、人－鼠嵌合抗体212

二、小分子抗体213

三、双特异性抗体213

四、噬菌体抗体214

第十二章 细胞培养的应用217

第一节 细胞培养在分子生物学中的应用217

一、分离提取研究217

二、外源基因转染导入技术221

三、原位检测技术225

第二节 细胞培养在生物工程中的应用226

一、大规模细胞培养的体系参数227

二、大规模细胞培养的工艺类型227

三、大规模细胞培养方法228

第三节 细胞培养在生物制品中的应用231

一、生物制品的概念231

二、细胞培养在疫苗制备中的应用231

第四节 细胞培养在药物开发中的应用232

第五节 细胞培养在临床医学中的应用238

一、细胞培养在临床诊断中的应用239

二、细胞培养在临床治疗中的应用240

三、诱导性多能干细胞培养的应用前景243

第十三章 细胞毒性246

第一节 存活率246

一、染料排斥法测定细胞存活率247

二、染料摄取法测定细胞存活率247

三、中性红摄取法247

第二节 生存力247

第三节 代谢性细胞毒测定249

第四节 转化和诱变251

第五节 刺激性252

第十四章 细胞培养常见问题解答254

第一节 细胞培养相关问题254

一、细胞培养开始前的准备工作254

二、所需细胞从何引进／订购254

三、如何准备细胞培养的用品254

第二节 细胞培养液使用相关问题254

一、细胞培养时应使用哪种培养基254

二、液体培养基的保存应该冷藏还是冷冻255

三、细胞培养液中是否需要添加谷氨酰胺255

四、培养用液pH对细胞生长有什么影响255

五、为什么培养液pH值变化太快255

六、培养液出现沉淀时pH值是否会发生变化255

七、培养细胞所用培养液需要的渗透压255

八、培养基在使用过程中应注意的问题256

九、为什么MEM需加NEAA？256

十、为什么有的细胞需要丙酮酸钠？如何向培养液中添加？256

十一、为什么有的细胞需要添加胰岛素？256

十二、培养液中可以使用HEPES吗？256

十三、培养液为何需避光保存？256

十四、有没有培养液培养时不需要CO2孵箱？256

十五、抗生素的使用方法256

第三节 细胞培养血清使用常见问题256

一、血清的级别256

二、血清的最佳化冻方式257

三、血清化冻后为什么是浑浊的？257

四、胎牛血清的替代品257

五、血清为何要灭活257

六、血清灭活的正确方法257

第四节 细胞传代常见问题257

一、培养细胞何时需传代？多长时间传一次？257

二、单层贴壁细胞如何传代？257

三、细胞传代消化时所用胰蛋白酶浓度越高越好吗？258

四、传代后培养细胞不贴壁的原因258

五、悬浮培养细胞如何传代258

六、悬浮培养细胞如何换液258

七、悬浮细胞为什么成团258

八、原代细胞培养物污染的原因258

九、培养细胞生长减慢的原因258

十、培养细胞死亡的原因258

十一、如何将单次贴壁生长细胞驯化为悬浮培养细胞259

十二、细胞培养适用的CO2浓度259

十三、实验室没有现成的细胞所需培养基，是否可以换为另一种培养基？259

第五节 细胞及培养液质量检测相关问题259

一、为什么有些细胞没有传代数259

二、细胞培养应检测的微生物259

三、如何筛查支原体污染259

四、支原体污染的细胞能否去除支原体259

第六节 细胞冻存复苏相关问题260

一、没有程序冻存仪的情况下如何保证最优冷冻速度260

二、在液氮中冻存细胞能保存多久260

附录Ⅰ 实验室常用的细胞系（株）261

附录Ⅱ-1 常用缓冲液263

附录Ⅱ-2 其他缓冲液的配制265

附录Ⅲ 常用人工合成细胞培养基267

附录Ⅳ 细胞培养常用英语词汇268

中英文名词对照索引279