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第一章　绪论1

第一节 生物化学检验的研究目的和任务1

一、生物化学检验的研究目的1

二、生物化学检验的任务1

第二节 生物化学检验的发展简史2

一、生物化学检验的初期阶段2

二、以酶学技术和自动化技术为代表的发展阶段2

三、分子生物学技术发展阶段2

第二章　生物化学检验实验室基本知识4

第一节 实验用纯水4

一、实验室用水等级4

二、纯水的制备方法5

三、水的纯度检查5

第二节 常用临床实验室器材6

一、微量加样器的使用6

二、常用玻璃器材的使用与清洗6

第三节 生物化学检验试剂概述8

一、化学试剂的种类与保存8

二、化学试剂的配制8

实验2-1　磷酸盐缓冲液的配制9

三、试剂盒的选择与评价9

第四节　参考范围和医学决定水平11

一、参考范围11

二、医学决定水平12

第五节 实验方法与参考物质概述13

一、实验方法的概念与分级13

二、参考物质的分级16

第六节 实验方法的选择与评价17

一、实验误差17

二、方法学评价指标19

三、实验方法选择与评价的原则、内容和步骤24

四、方法学评价试验25

实验2-2　批内重复性试验25

实验2-3　回收试验27

实验2-4　干扰试验28

实验2-5　线性范围试验30

实验2-6　方法比较试验31

五、方法性能判断32

第七节 实验的临床诊断性能评价34

一、临床诊断试验的评价标准与指标34

二、受试者工作曲线36

第三章　光谱分析技术37

第一节　吸收光谱分析37

一、光吸收曲线37

二、光吸收定律38

三、比色分析仪器38

四、比色分析方法39

五、原子吸收分光光度法41

实验3-1　722型分光光度计的使用41

实验3-2　分光光度计性能检测42

第二节　散射光谱分析42

一、透射比浊法43

二、散射比浊法与散射比浊仪43

三、影响比浊法测定的因素43

四、比浊法的应用44

第三节　发射光谱分析45

一、火焰光度法45

二、荧光光度法46

第四章 电泳技术49

第一节 电泳的基本原理和操作要点49

一、电泳的基本原理49

二、电泳技术的操作要点51

第二节 常用电泳技术52

一、醋酸纤维素薄膜电泳52

二、琼脂糖凝胶电泳52

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳53

四、实验方法54

实验4-1　醋酸纤维素薄膜电泳测定血清蛋白质54

实验4-2　琼脂糖凝胶电泳测定血清脂蛋白56

第三节　特殊电泳技术介绍57

一、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳57

二、等电聚焦电泳57

三、双向电泳58

四、印迹法58

五、显微电泳58

六、自由界面电泳59

第五章　酶学分析技术60

第一节 酶活性测定的基本知识60

一、酶活性60

二、酶活性单位与酶活性浓度60

三、酶促反应进程61

四、酶促反应动力学62

第二节　酶活性单位的计算与校准64

一、酶活性单位的计算64

二、酶活性单位的校准68

第三节 酶活性的测定71

一、按照反应时间分类的酶活性测定方法71

实验5-1　定时法测定血清淀粉酶71

实验5-2　速率法测定血清乳酸脱氢酶73

二、按照检测对象分类的酶活性测定方法74

三、工具酶的应用77

四、酶活性测定的影响因素78

第四节　代谢物的酶法测定83

一、终点法83

二、速率法84

第五节 同工酶测定84

一、同工酶的产生机制85

二、同工酶的测定方法85

第六章 自动生化分析技术88

第一节 自动生化分析仪的类型88

一、管道式分析仪88

二、离心式分析仪89

三、分立式分析仪89

四、干片式分析仪92

五、半自动生化分析仪93

六、自动模块化系统93

七、全实验室自动化分析系统93

第二节 自动生化分析方法94

一、分析方法的种类94

二、自动生化分析仪的校准方法95

第三节 自动生化分析仪的参数设置96

一、波长96

二、反应温度97

三、分析方法97

四、样本量和试剂量97

五、分析时间97

六、线性范围98

七、自动生化分析仪测定参数举例98

第四节 自动生化分析仪的性能评价99

一、自动化程度99

二、分析效率99

三、应用范围100

四、分析准确度100

第五节 自动生化分析仪的质量保证101

一、正确的安装与合适的工作环境101

二、电源供给101

三、纯水处理系统101

四、仪器的操作101

五、维护与保养101

六、室内质量控制102

第七章　分子生物学技术简介103

第一节　分子生物学检验技术103

一、分子生物学技术的研究进展103

二、人类基因组概念104

三、分子生物学检验技术104

第二节　核酸的分离制备104

一、DNA的分离与纯化104

二、RNA的分离与纯化105

第三节 限制性核酸内切酶切分析106

一、限制性核酸内切酶分析的基本原理106

二、DNA的限制性核酸内切酶酶切分析106

第四节 聚合酶链反应107

一、聚合酶链反应的原理107

二、聚合酶链反应的一般操作108

三、聚合酶链反应的实验室要求108

四、聚合酶链反应的临床应用109

第五节 分子杂交与生物芯片109

一、分子杂交110

二、生物芯片112

第八章　其他常用分析技术115

第一节 电化学分析115

一、概述115

二、离子选择电极分析法115

第二节　层析技术117

一、层析技术的基本原理117

二、层析技术的分类118

实验8-1　胶体金免疫层析法测定血清心肌肌钙蛋白Ⅰ119

第三节 离心技术120

一、离心技术的原理120

二、离心技术的方法121

第九章　血浆蛋白质检验124

第一节　概述124

一、血浆蛋白质的组成、功能及分类124

二、常见血浆蛋白质特性概述125

三、疾病时的血浆蛋白质129

第二节　血浆蛋白质测定130

一、总蛋白测定130

实验9-1　双缩脲法测定血清（浆）总蛋白131

二、清蛋白测定133

实验9-2　溴甲酚绿法测定血清清蛋白133

实验9-3　溴甲酚紫法测定血清清蛋白135

三、黏蛋白测定136

实验9-4　酚试剂法测定血清黏蛋白136

四、C反应蛋白测定138

实验9-5　胶乳凝集法测定C反应蛋白138

实验9-6　免疫透射比浊法测定C反应蛋白139

第十章　血糖及糖复合物检验141

第一节　概述141

一、血糖的来源和去路141

二、血糖浓度的调节141

三、糖代谢紊乱142

第二节　血糖测定143

一、血糖测定方法简介144

二、血糖测定的临床意义144

三、实验方法145

实验10-1　葡糖氧化酶法测定血糖145

实验10-2　己糖激酶法测定血糖146

第三节　糖耐量试验147

一、糖耐量和葡萄糖耐量试验147

二、口服葡萄糖耐量试验147

三、妊娠糖尿病148

四、糖尿病诊断程序148

第四节 血清糖化血红蛋白和糖化血清蛋白测定149

一、糖化血红蛋白测定149

实验10-3　微柱法分离与比色法测定糖化血红蛋白150

实验10-4　免疫凝集法测定糖化血红蛋白151

二、糖化血清蛋白测定152

实验10-5　果糖胺法测定糖化血清蛋白152

第十一章　血脂及血浆脂蛋白检验154

第一节　概述154

一、血脂和血浆脂蛋白154

二、脂蛋白代谢157

三、脂蛋白代谢紊乱158

四、临床血脂分析项目160

第二节 血脂、血浆脂蛋白及载脂蛋白测定161

一、血浆静置试验161

二、总胆固醇的测定161

实验11-1　胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇162

三、三酰甘油的测定163

实验11-2　磷酸甘油氧化酶法测定血清三酰甘油164

四、高密度脂蛋白-胆固醇的测定165

实验11-3　磷钨酸-镁沉淀法测定血清高密度脂蛋白-胆固醇166

五、低密度脂蛋白-胆固醇的测定167

实验11-4　表面活性剂清除法测定血清低密度脂蛋白-胆固醇168

六、载脂蛋白的测定170

实验11-5　免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白AⅠ和载脂蛋白B100170

第十二章　钠、钾、氯和酸碱平衡检验173

第一节　概述173

一、钠、钾、氯的生理作用173

二、钠、氯代谢及其平衡紊乱174

三、钾代谢及其平衡紊乱175

第二节　血清钠、钾、氯测定175

一、血清钠、钾测定175

实验12-1　离子选择电极法测定血清钠、钾177

二、血清氯化物的测定178

实验12-2　硫氰酸汞比色法测定血清氯化物179

实验12-3　硝酸汞滴定法测定血清氯化物181

第三节　酸碱平衡182

一、气体在血液中的运输182

二、酸碱平衡与酸碱平衡失调184

三、血气分析的测定原理184

四、血气分析的方法186

五、血气分析的常用指标及应用188

六、实验方法190

实验12-4　酶法测定二氧化碳190

第十三章　钙、磷、镁和微量元素检验192

第一节　钙、磷代谢及其平衡紊乱192

一、钙的代谢192

二、磷的代谢193

三、钙、磷代谢的调节193

四、钙和磷代谢紊乱194

第二节　镁代谢及其平衡紊乱194

一、镁的代谢195

二、镁代谢紊乱195

第三节　微量元素与疾病195

一、必需微量元素的共同特征196

二、必需微量元素的含量、分布及生理功用196

三、必需微量元素与疾病的关系197

第四节　钙、磷、镁和微量元素铁、铜、锌的测定198

一、血清钙测定198

实验13-1　邻甲酚酞络合酮比色法测定血清总钙198

实验13-2　甲基麝香草酚蓝比色法测定血清总钙199

二、血清无机磷测定200

实验13-3　磷钼酸法测定血清无机磷201

三、血清镁测定202

四、微量元素铁测定202

实验13-4　亚铁嗪比色法测定总铁结合力和血清铁203

五、微量元素铜测定204

六、微量元素锌测定205

第十四章　肝脏功能检验207

第一节　概述207

一、肝脏的结构特点207

二、肝脏的生物化学功能208

三、某些肝脏疾病的临床生物化学210

四、肝功能试验的分类212

第二节　血清氨基转移酶测定212

一、氨基转移酶测定方法简介212

二、氨基转移酶测定的意义213

三、实验方法213

实验14-1　赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶213

实验14-2　速率法测定血清丙氨酸氨基转移酶216

第三节 血清碱性磷酸酶测定217

一、碱性磷酸酶测定方法简介217

二、碱性磷酸酶测定的意义218

三、实验方法218

实验14-3　速率法测定血清碱性磷酸酶218

实验14-4　金氏法测定血清碱性磷酸酶219

第四节　血清γ-谷氨酰基转移酶测定221

一、γ-谷氨酰基转移酶测定方法简介221

二、γ-谷氨酰基转移酶测定的意义221

三、实验方法221

实验14-5　速率法测定血清γ-谷氨酰基转移酶221

实验14-6　重氮比色法测定血清γ-谷氨酰基转移酶222

第五节　血清胆红素测定224

一、胆红素测定方法简介224

二、胆红素测定的意义226

三、实验方法226

实验14-7　改良J-G法测定血清胆红素226

实验14-8　胆红素氧化酶法测定血清胆红素228

第六节　血清胆汁酸测定229

一、胆汁酸测定方法简介229

二、胆汁酸测定的意义230

三、实验方法231

实验14-9　酶比色法测定血清总胆汁酸231

第七节　肝功能试验的意义和选择233

一、肝功能试验的意义和评价233

二、肝功能试验的选择原则233

第十五章　肾脏功能检验235

第一节　概述235

一、肾脏的结构与功能235

二、肾脏疾病的生物化学变化237

三、肾脏功能试验的评价与选择原则238

第二节　血清尿素测定242

一、尿素测定方法简介242

二、尿素测定的临床意义243

三、实验方法243

实验15-1　二乙酰一肟法测定血清尿素243

实验15-2　酶偶联速率法测定血清尿素244

第三节　血清肌酐测定245

一、肌酐测定方法简介245

二、肌酐测定的临床意义246

三、实验方法247

实验15-3　碱性苦味酸法测定血清肌酐247

实验15-4　肌酐酰氨基水解酶法测定血清肌酐248

四、内生肌酐清除率测定249

第四节　血清尿酸的测定251

一、尿酸测定方法简介251

二、尿酸测定的临床意义251

三、实验方法251

实验15-5　磷钨酸还原法测定血清尿酸251

实验15-6　尿酸酶偶联比色法测定血清尿酸253

第十六章　心肌损伤标志物检验255

第一节　概述255

一、心脏的结构与功能255

二、急性心肌梗死的诊断标准257

三、心肌损伤标志物的选择与评价258

第二节　肌酸激酶的测定266

一、肌酸激酶测定方法简介266

二、肌酸激酶测定的临床意义266

三、实验方法267

实验16-1　酶偶联法测定血清肌酸激酶267

第三节　肌钙蛋白的测定268

一、肌钙蛋白测定方法简介268

二、肌钙蛋白测定的临床意义269

三、实验方法269

实验16-2　免疫比浊法测定血清肌钙蛋白Ⅰ269

第十七章 内分泌功能检验272

第一节　概述272

一、激素的概念与分类272

二、激素的作用机制与调节273

三、内分泌疾病的诊断273

四、激素的测定方法简介273

第二节 甲状腺功能测定274

一、甲状腺激素的代谢与分泌调节274

二、甲状腺激素的生理功能275

三、甲状腺功能紊乱275

四、甲状腺激素的测定276

实验17-1　化学发光法测定总3,5,3′-三碘甲腺原氨酸（TT3）277

五、其他指标278

第三节 肾上腺功能测定279

一、肾上腺皮质功能的测定279

二、肾上腺髓质功能的测定281

第四节 下丘脑-垂体激素的测定283

一、垂体分泌的激素283

二、下丘脑分泌的激素284

三、下丘脑-腺垂体激素分泌的调节285

主要参考文献286

汉英索引288