家蚕生物反应器【2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载】

家蚕生物反应器PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

第一章 家蚕的分子生物学1

第一节 家蚕的生物学特性1

1生活史1

2蚕的外部形态2

3家蚕的生长与发育2

4养蚕的环境标准3

第二节 杆状病毒基因组学3

1杆状病毒及其侵染机制3

2杆状病毒基因组学研究7

3杆状病毒基因结构与功能20

第三节 蚕蛹的小RNA研究35

1蚕蛹小RNA的研究35

2蛹mRNA-like小RNA的研究43

第四节 家蚕蛹cDNA文库的构建和蛋白质组学75

1家蚕蛹cDNA文库的构建75

2家蚕蛹蛋白质组学79

第五节 基于家蚕杆状病毒表面展示技术的膜蛋白组学90

1基于家蚕杆状病毒表面展示技术分离膜蛋白的方法91

第二章 以核型多角体病毒为载体的昆虫表达系统98

第一节 昆虫细胞/NPV表达系统的原理和经典操作方法98

1原理98

2转移载体质粒的构建98

3重组病毒的组建和筛选101

第二节 最新发展的改进型操作方法102

1 NPV DNA线性化102

2 NPV DNA线性化并删除ORF1629103

3在S．cerevisiae中YAC介导的NPV重组103

4在E．coli中转座子介导的NPV重组104

5体外定点重组104

6 Bac to Bac系统105

7杆状病毒表面展示技术109

第三节 外源基因的表达、转录及转译后加工112

1真核生物、病毒、细菌、霉菌等多种来源基因的表达112

2转录后加工112

3糖基化113

4磷酸化、脂肪酰化和酰胺化113

5蛋白水解114

6细胞内定位和分泌114

7高级结构的形成114

第四节 昆虫细胞/NPV表达系统的优越性和缺陷115

1昆虫细胞/NPV表达系统的优越性115

2家蚕/BmNPV表达系统相对于Sf细胞/AcMNPV表达系统的优势115

第五节 BmBacPAK病毒的组建116

1 BmBacPAK病毒的组建技术116

2 BmBacPAK病毒118

第六节 BmBacPAK载体病毒在家蚕细胞中进行报告基因的表达121

1质粒的构建121

第七节 家蚕核型多角体病毒p26基因及同源重复区hr3的克隆和序列分析125

第八节 家蚕核型多角体病毒同源重复区hr5的克隆和序列分析128

1 BmNPV DNA KpnⅠ-D片段的克隆及两端序列分析128

2 BmNPV hr5全序列分析128

第九节 BmNPV hr5的重复起始区功能130

1含BmNPV hr5结构的质粒在BmNPV感染的BmN细胞中的复制130

2 pB hr5和pB hr5 a质粒在AcMNPV感染的Sf21细胞中的复制131

3 AcMNPV的hr序列是一种增强子131

4不同NPV在不同宿主细胞中功能和结构不同132

第三章 家蚕组织细胞系的构建133

第一节 家蚕细胞研究概述133

1全能性和多能性昆虫干细胞134

2限制性和单能性昆虫干细胞137

第二节 家蚕组织细胞系的建立140

1细胞系的核型分析140

2细胞系的有丝分裂141

3细胞系的同工酶检测142

4细胞对BmNPV的敏感性分析142

5家蚕胚胎细胞系的构建143

6家蚕卵巢细胞系的建系方法144

附录145

1细胞培养用液的配制与消毒145

2培养细胞的细胞生物学147

3家蚕细胞显微注射技术154

第四章 家蚕生物反应器及其应用157

第一节 何谓家蚕生物反应器157

1家蚕生物反应器的定义、分类及建立方法157

2转基因家蚕157

3家蚕杆状病毒表达载体系统（BmNPV）159

第二节 利用家蚕生物反应器生产生物制品162

1多肽与蛋白质类药物给药系统的研究状况162

2家蚕生物反应器生产重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子169

3家蚕生物反应器表达霍乱毒素B亚基（CTB）与胰岛素B链融合蛋白对治疗糖尿病的研究190

4家蚕生物反应器表达的人破骨细胞形成抑制因子及其突变体生物活性研究230

5重组人促红细胞生成素（EPO）胶囊的药效学研究235

6家蚕杆状病毒表达系统表达的人乳铁蛋白rhLF的药效学研究237

第五章 家蚕生物反应器的应用前景241

1家蚕生物反应器的特点242

2家蚕生物反应器的主要应用方向243

3家蚕生物反应器的主要应用现状244

4家蚕生物反应器发展趋势246

5家蚕生物反应器生产新型人用禽流感疫苗247

第六章 家蚕生物反应器生产生物制品的标准281

1重组人粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子胶囊中试产品制造和检定规程草案281

附件一 rhGM-CSF生物活性测定285

附件二 外源病毒污染检查287

附件三 ELISA检测rhGM-CSF含量287

附件四 蛋白质电泳288

附件五 家蚕表达的rhGM-CSF的纯化289

2重组人的促红生成素（EPO）胶囊的中试产品制造和检定规程草案290

附件一 ELISA检测EPO含量294

附件二 家蚕表达的EPO的纯化295

3重组人胰岛素（CTB）胶囊中试产品制造和检定规程草案295

附件一 外源病毒污染检查299

附件二 ELISA检测CTB含量299

附件三 蛋白质电泳300

附件四 家蚕表达人胰岛素（CTB）的纯化302

4重组人破骨细胞形成抑制因子（OPG）胶囊中试产品制造和检定规程草案302

5重组人乳铁蛋白（hLF）胶囊中试产品制造和检定规程草案306

附件一 外源病毒污染检查310

附件二 ELISA检测hLF含量310

附件三 蛋白质电泳311

附件四 家蚕表达的hLF的纯化312

参考文献314