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第一部分 生物化学实验的基本原理和技术2

第一章 生物大分子制备技术2

第一节 材料的选择和预处理2

第二节 细胞的破碎及细胞器的分离3

第三节 生物大分子的提取和分离纯化4

第四节 样品的浓缩、保存及纯度鉴定7

第五节 生化实验样品制备9

第二章 离心技术12

第一节 基本原理12

第二节 离心机的类型和使用方法13

第三节 常用离心方法15

第三章 分光光度技术16

第一节 基本原理16

第二节 分光光度计的基本结构18

第三节 分光光度技术的基本应用20

第四节 提高测量精确度的方法20

第四章 层析技术22

第一节 层析的基本理论22

第二节 常用的层析技术介绍24

第五章 电泳技术42

第一节 电泳的基本原理和影响因素42

第二节 常用电泳操作技术45

第三节 电泳设备及其应用47

第二部分 生物化学实验51

第六章 氨基酸及蛋白质类实验51

实验一 薄层层析法分离氨基酸51

实验二 纸层析法分离氨基酸53

实验三 氨基氮的测定——甲醛滴定法54

实验四 蛋白质的沉淀反应56

实验五 蛋白质的两性反应和等电点测定58

实验六 双缩脲法测定蛋白质含量60

实验七 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量62

实验八 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量63

实验九 紫外吸收法测定蛋白质含量65

实验十 微量凯氏定氮法测定粗蛋白含量66

实验十一 乙酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质70

实验十二 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离蛋白质73

实验十三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量77

实验十四 离子交换柱层析法分离混合氨基酸79

实验十五 酪蛋白的制备81

实验十六 细胞色素C的制备及测定82

实验十七 血清免疫球蛋白的分离纯化及鉴定84

第七章 核酸类实验90

实验十八 动物组织中DNA的提取与含量测定90

实验十九 酵母RNA的提取及鉴定92

实验二十 质粒DNA的微量快速提取与鉴定95

实验二十一 PCR基因扩增DNA98

实验二十二 DNA琼脂糖凝胶电泳检测100

实验二十三 二苯胺显色法测定DNA含量102

实验二十四 地衣酚显色法测定RNA含量103

实验二十五 定磷法测定核酸含量104

第八章 酶类实验107

实验二十六 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活力的影响107

实验二十七 琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制109

实验二十八 蔗糖酶活力测定110

实验二十九 血清转氨酶活力测定112

实验三十 蛋清溶菌酶的制备及活力测定114

实验三十一 碱性磷酸酶的分离与纯化116

实验三十二 淀粉酶的活力及比活力测定119

实验三十三 蛋白酶活力测定121

实验三十四 大蒜超氧化物歧化酶（SOD）的分离提取与活力测定124

第九章 维生素类实验127

实验三十五 维生素C的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）127

实验三十六 维生素A的定量测定（比色法）129

实验三十七 维生素B2的定量测定131

实验三十八 维生素B12的定量测定（HPLC法）132

第十章 糖类实验135

实验三十九 糖类性质实验135

实验四十 血糖的定量测定（福林-吴宪法）137

实验四十一 总糖和还原糖测定（3，5-二硝基水杨酸法）139

实验四十二 肝糖原的提取与鉴定141

实验四十三 果胶的提取142

实验四十四 糖酵解产物乳酸的测定144

第十一章 脂类实验146

实验四十五 粗脂肪的定量测定（索氏抽提法）146

实验四十六 卵磷脂的提取及鉴定147

实验四十七 脂肪酸价的测定149

实验四十八 脂肪碘值的测定150

第十二章 其它实验152

实验四十九 水分的测定152

实验五十 血清无机磷的定量测定154

实验五十一 血清钙测定（EDTA-Na2滴定法）155

实验五十二 叶绿素含量的测定（分光光度法）156

实验五十三 畜禽肉中己烯雌酚的测定（高效液相色谱法）158

实验五十四 酶联免疫吸附法（ELISA）测定食品中磺胺二甲嘧啶残留160

实验五十五 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法162

附录165

一、试剂的配制165

（一）常用溶液浓度的单位及计算165

（二）标准溶液的配制和标定166

（三）常用缓冲溶液的配制167

（四）调整硫酸铵溶液饱和度计算表174

二、生物化学实验常用参数175

（一）一般化学试剂的分级175

（二）实验室分析用水规格176

（三）常用酸碱的相对密度和质量分数、溶解度的关系176

（四）常见蛋白质等电点参考值180

（五）元素的相对原子质量表182

参考文献184