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前言3

第一部分 基础性技术3

第一章　植物的水分代谢3

第一节　植物组织自由水和束缚水含量的测定3

第二节　植物组织水势的测定4

第三节　植物组织渗透势的测定5

第四节　植物组织含水量的测定6

第五节　植物组织水分饱和亏缺的测定7

第六节　钾离子对植物气孔开度的影响8

第七节　植物叶片蒸腾强度的测定8

第二章　植物的矿质代谢10

第一节　TTC法测定植物根系活力10

第三节　植物伤流液的收集及糖和氨基酸的测定11

第二节　植物伤流量的测定11

第四节　培养液中N、P、K的定量测定12

第五节　植物对铵离子的吸收动力学15

第六节　植物对离子的选择性吸收16

第七节　植物组织中总氮、蛋白质氮含量的测定17

第三章　植物的光合代谢20

第一节　环境因子对植物光合作用的影响20

第二节　植物光合速率的测定21

第三节　叶绿体色素的提取、分离及理化性质25

第四节　叶绿素含量的测定26

第五节　植物希尔反应的观察27

第六节　核酮糖－1,5－二磷酸羧化酶／加氧酶（Rubisco）活性的分光光度计法测定28

第七节　Rubisco的定量分析30

第八节　叶绿体光诱导荧光强度的测定32

第九节　植物组织ATP酶活性测定33

第十节　磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定34

第十一节　RCA活性及含量的测定36

第四章　植物的呼吸代谢38

第一节　植物呼吸速率的测定38

第二节　过氧化氢酶活性测定40

第三节　苯丙氨酸解氨酶活性的测定41

第四节　过氧化物酶活性的测定41

第五节　多酚氧化酶活性的测定42

第六节　果胶酶活性的测定43

第五章　植物激素45

第一节 乙烯含量的气相色谱法测定45

第二节　植物激素含量的测定46

第三节　赤霉素对α－淀粉酶的诱导形成48

第四节　萘乙酸对植物种子萌发的影响49

第五节　植物激素对器官脱落的调节50

第六节　植物激素脱落酸和赤霉素的提取、分离及测定51

第七节　GA3促进植物种子萌发54

第八节　细胞分裂素的抗衰老作用55

第六章　植物的生长生理57

第一节　淀粉酶活性的测定57

第二节　植物淀粉含量的测定58

第三节　植物种子生命力的测定60

第四节　植物组织中ATP含量的测定61

第五节　植物组织中脂肪酸含量的测定63

第六节　植物种子中主要不饱和脂肪酸的分离64

第七节　植物组织中纤维素含量的测定65

第八节　植物组织中可溶性糖含量测定66

第九节　植物组织中还原糖含量的测定67

第十节　植物种子中赖氨酸含量的测定68

第十一节　植物种子萌发过程中的淀粉、脂肪和蛋白质的转化69

第十二节　植物组织培养技术71

第七章　植物生殖生理83

第一节　植物光周期现象的观察83

第二节　植物光周期的诱导84

第三节　植物春化现象的观察85

第四节　花粉的生长及其向化性86

第五节　花粉活力的测定87

第八章　植物的成熟和衰老生理90

第一节　植物组织中丙二醛含量的测定90

第二节　植物超氧化物歧化酶活性的测定91

第三节　植物脂肪氧化酶活性的测定92

第九章　植物的抗性生理94

第一节　脯氨酸含量的测定94

第二节　维生素C含量的测定95

第三节　植物组织抗逆性的测定96

第十章　糖类99

第一节　碳水化合物的斐林试剂比色法测定99

第二节　碳水化合物的蒽酮比色法测定100

第三节　糖的颜色反应101

第四节　酮体的生成102

第十一章　脂类103

第一节　磷硫铁试剂法定量测定血清总胆固醇103

第二节　血清甘油三酯的测定104

第三节　脂肪酸的β－氧化105

第四节　卵磷脂的提取和鉴定107

第十二章　蛋白质、氨基酸108

第一节　蛋白质含量的测定108

第二节　血清蛋白的电泳116

第三节　血清γ－球蛋白的提纯120

第四节　蛋白质分子量的测定122

第五节　蛋白质的一般性质125

第六节　蛋白质相对分子质量的测定127

第七节 甲醛滴定法测定氨基氮128

第十三章　酶类130

第一节　酶作用的一般性质130

第二节 碱性磷酸酶的提取、分离与纯化132

第三节　碱性磷酸酶最适pH的测定133

第四节　碱性磷酸酶最适温度的测定134

第五节　酶促反应初速率时间范围测定134

第六节　米氏常数（Km）和最大反应速率（Vm）的测定136

第七节　抑制剂对酶活力的影响138

第八节　氨基酰化酶的测定140

第九节　酶联免疫吸附测定143

第一节　酵母核糖核酸的提取及测定145

第十四章　核酸145

第二节　核酸的定量测定——定磷法146

第三节　离子交换色谱分离核苷酸148

第十五章 植物组织中核酸的提取与检测151

第一节　植物组织中基因组DNA的提取与测定151

第二节 DNA的凝胶电泳152

第三节　植物总RNA的提取与测定154

第四节 mRNA纯化156

第五节 RNA的琼脂糖凝胶电泳158

第十六章　基因克隆160

第一节　PCR技术160

第二节 cDNA-AFLP技术162

第三节 cDNA文库构建技术166

第四节 质粒DNA的提取、分离和纯化176

第五节　大肠杆菌感受态细胞的制备和转化179

第六节　重组质粒的连接、转化及筛选182

第七节　根癌农杆菌介导转化烟草184

第八节 RFLP和RAPD技术186

第九节 DNA序列的测定188

第十节 植物基因cDNA全长的克隆189

第十一节 基因组AFLP技术191

第十二节　SSR和CAPS分析技术192

第十七章　基因表达196

第一节　克隆基因在E.coli中的表达196

第二节 RT-PCR和定量RT-PCR199

第三节　Southern杂交分析技术202

第四节　Northern杂交分析技术205

第五节　Western杂交分析技术208

第六节　植物组织原位杂交分析技术210

第七节　酵母双杂交分析技术219

第八节　芯片杂交分析技术225

第二部分　综合性技术233

第十八章 植物氮素缺乏的生理机理研究233

第一节　植物的日常培养与管理233

第二节　植物根系的表型分析233

第三节　植物根系活力的测定234

第四节　植物硝酸还原酶活性的测定237

第五节　植物细胞有丝分裂指数的测定239

第十九章　植物光合生理的研究241

第一节　植物叶片光合速率及其环境因子的测定241

第二节　植物光响应曲线和CO2响应曲线的制作243

第三节　植物叶面积的测定246

第一节　IAA和ABA的生物鉴定248

第二十章　植物激素的生物鉴定248

第二节　GA3、CTK、ABA的生物鉴定250

第二十一章 植物生长调节剂在植物生长发育中的作用252

第一节　植物生长调节剂在种子休眠与萌发中的作用252

第二节　植物生长调节剂在植物生长中的作用254

第三节　植物生长调节剂在插条生根中的作用255

第四节　植物生长调节剂在化学除草中的作用257

第五节　植物生长调节剂在化学杀雄中的作用257

第六节　植物生长调节剂在花期调控中的作用257

第七节　植物生长调节剂在果实成熟中的作用258

第八节　植物生长调节剂在鲜花保鲜中的作用259

第九节　植物生长调节剂在植物性别调控中的作用261

第十节　植物生长调节剂在果实催熟中的作用262

第二节　植物细胞膜透性的测定264

第一节　材料准备264

第二十二章　植物的抗性生理机理研究264

第三节　丙二醛和脯氨酸含量的测定266

第二十三章　植物衰老的生理机理研究267

第二十四章　超氧化物歧化酶的分离、纯化269

第一节　超氧化物歧化酶的活性测定269

第二节　动物血中超氧化物歧化酶的提取271

第三节　离子交换法分离纯化超氧化物歧化酶272

第四节　金属螯合色谱分离纯化超氧化物歧化酶272

第三部分 研究性技术277

第二十五章　植物气孔开闭机理研究技术277

第二十六章　植物必需元素的验证279

第二十七章　C3植物和C4植物的筛选280

第二十八章 环境因子对植物光合速率的影响282

第二十九章 延长果实贮藏保鲜时间的研究技术284

第三十章　植物向性运动的研究技术286

第三十一章　植物激素对植物生长发育的影响287

第三十二章　植物细胞全能性的验证288

第三十三章 林木种质保存和基因库的建设方案289

第三十四章　植物组培苗培养及其产业化生产290

第三十五章　植物抗旱机理研究技术291

第三十六章　植物生长发育研究技术292

第一节 植物光合、呼吸、蒸腾速率及气孔导度和内部CO2浓度的测定292

第二节　植物叶片荧光测定293

第三节　植物希尔反应和光合磷酸化测定296

第四节　Rubisco功能与纯化299

第五节　Rubisco定量分析——免疫扩散法303

第三十七章　植物衰老机理研究技术304

第一节　植物体内可溶性蛋白和非可溶性蛋白的含量测定304

第三节　抗坏血酸含量及抗坏血酸过氧化物酶活性的测定305

第二节　植物组织中超氧物歧化酶（SOD）活性测定305

第四节　植物组织中过氧化物酶活性的测定（比色法）307

第五节　植物组织中过氧化氢酶活性的测定（比色法）307

第六节　植物组织或器官中丙二醛（MDA）含量的测定307

第三十八章　植物分子生物学研究技术308

第一节　农杆菌介导的基因转化方法308

第二节 利用RT-PCR方法克隆植物功能基因及基因测序310

第三十九章　分子杂交技术312

第一节　核酸探针标记的方法312

第二节　几种常见的杂交317

第三节　杂交反应的条件及参数的优化321

第四部分 实验基本要求325

第四十章 实验须知325

第四十一章　数据处理327

第四十二章　层析技术330

第四十三章 电泳技术336

第四十四章 常用仪器的使用方法342

第一节 电导率仪的使用方法342

第二节　分光光度计的使用方法342

第三节　超净工作台的使用方法349

第四节　高速冷冻离心机的使用方法350

第五节　电泳仪的使用方法351

第六节　阿贝折光仪的使用方法353

第七节　核酸蛋白检测仪的使用方法353

第八节　酶联免疫检测仪的使用方法354

第四十五章 常用试剂的配制355

第一节　玻璃仪器的洗涤355

第二节　常用酶的配制355

第三节　常用抗生素溶液的配制356

第四节　常用杂交试验用封闭剂357

第五节　常用贮存液的配制358

附录363

附录1　国际单位及其他363

附录2　常用有机溶剂及其主要性质365

附录3　常用贮存液的配制参数366

附录4　常用酸碱的技术参数369

附录5　常用凝胶的技术参数370

附录6　氨基酸的特性373

附录7　遗传密码374

附录8　一些常用的缓冲溶液375

附件9　常用培养基381

附录10　常用酸碱指示剂的特性382

附录11　常用组织培养药品383

附录12　实验报告范文384

主要参考书籍和文献387