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第一部分 分子生物学基础理论3

第一章 基因与基因组3

第一节 真核基因组3

第二节 真核结构基因6

第三节 人类基因组计划8

第二章 分子克隆策略10

第一节 DNA文库的建立10

第二节 克隆载体11

第三节 工具酶14

第四节 目的基因的获得16

第五节 目的序列与载体的连接17

第六节 目的克隆的筛选与鉴定19

第三章 基因体外原核与真核表达21

第一节 原核表达21

第二节 真核表达23

第四章 基因表达调控27

第一节 原核细胞的基因调控27

第二节 真核细胞表达调控31

第五章 基因芯片40

第一节 基因芯片概述40

第二节 基因芯片的应用48

第三节 基因芯片的进展50

第六章 基因诊断和基因治疗52

第一节 基因诊断52

第二节 基因治疗61

第七章 单核苷酸多态性66

第二部分 分子生物学技术71

第八章 DNA的基本分子生物学操作71

第一节 真核细胞DNA的制备与定量71

第二节 质粒DNA的碱裂解法提取与纯化73

第三节 入噬菌体DNA的提取75

第四节 DNA分子的限制性内切酶消化77

第五节 DNA片段回收与纯化80

第六节 目的基因的亚克隆81

第七节 聚合酶链式反应（PCR）体外扩增目的基因84

第八节 PCR产物的克隆87

第九节 放射性同位素标记的DNA序列测定分析89

第十节 Southern杂交92

第十一节 聚合酶链反应-单链构象多态性分析97

第十二节 人类染色体和间期核的荧光原位杂交100

第十三节 比较基因组杂交104

第十四节 引物原位标记技术108

第十五节 细胞凋亡的分子生物学检测方法110

第九章 RNA的基本分子生物学操作113

第一节 组织和细胞RNA的制备114

第二节 mRNA 的分离与纯化116

第三节 逆转录-聚合酶链反应118

第四节 Northe？杂交120

第五节 RNA酶保护试验125

第六节mRNA 差别显示技术128

第七节 原位杂交133

第十章 克隆化基因的体外表达及分析139

第一节 原核表达139

第二节 表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析141

第三节 Weste？免疫印迹142

第四节 表达蛋白的氨基酸序列测定145

第五节 表达蛋白的分离与纯化149

第六节 表达蛋白的单克隆抗体制备152

第七节 表达蛋白的生物学活性检测154

第八节 真核转染156