图书介绍
分子生物学与蛋白质化学实验方法【2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载】
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- (美)布伦达 D.斯潘格勒著;茹炳根 韩铁钢 茹强译 著
- 出版社: 北京:化学工业出版社
- ISBN:7502580921
- 出版时间:2006
- 标注页数:178页
- 文件大小:7MB
- 文件页数:190页
- 主题词:分子生物学-化学实验;蛋白质-化学实验
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图书目录
目录1
引言和背景1
第一部分 分子生物学9
实验一11
微量移液器使用指南11
实验二17
质粒DNA模板的制备17
(2)PCR扩增质粒DNA的LTB基因24
(1)测定质粒DNA浓度24
实验三24
实验四36
(1)琼脂糖凝胶电泳36
(2)PCR产物回收36
实验五43
(1)限制性内切酶酶切LTB插入基因和载体43
(2)平板制备43
(2)酶切后插入基因片段和载体的回收50
(1)琼脂糖凝胶电泳法纯化酶切后的插入基因片段和载体50
实验六50
实验七56
(1)DNA浓度测定56
(2)插入基因与载体的连接56
实验八63
重组体转化宿主细胞63
(3)接种培养物/PCR反应/分离质粒70
(2)用可能的重组子划线平板70
(1)挑取菌落,PCR检测插入片段70
实验九70
实验十75
(1)琼脂糖凝胶电泳检测插入基因75
(2)用质粒少量制备试剂盒纯化pET28LTB75
实验十一80
(1)DNA浓度检测80
(2)乙醇沉淀质粒DNA80
(3)测序反应80
(2)测序凝胶示范87
实验十二87
(1)纯化延伸反应产物87
实验十三91
(1)分析序列数据91
(2)验证插入序列91
实验十四98
(1)基因表达98
(2)表达宿主的转化98
诱导LTB基因表达:测定最大表达的时间104
实验十五104
第二部分 蛋白质化学109
实验十六111
(1)SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析诱导时间过程111
(2)用Western blot将蛋白质转移至膜上111
实验十七120
Western Blot的显像120
实验十八125
大规模培养物的制备125
亲和层析法分离LTB130
实验十九130
实验二十134
(1)柱层析分段物的SDS-PAGE鉴定134
(2)免疫印迹检验LTB的存在134
实验二十一140
蛋白质浓缩和结晶140
实验二十二147
准备ELISA微量滴定板来分析系列神经苷脂配体147
实验二十三153
用ELISA分析系列神经节苷脂配体153
实验二十四161
蛋白质结构测定:X射线衍射技术161
实验二十五168
用X射线衍射分析蛋白质晶体的特征(可任选)168
实验二十六169
引物设计169
索引173
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