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目录1

第一篇　实验基础知识1

第一章　实验室规则1

第二章　生物化学及分子生物学实验的基本操作3

第二篇 常用生物化学及分子生物学实验原理及技术6

第一章　离心分离技术6

第二章　分光光度法10

第三章　层析法14

第一节 层析法的原理及分类14

第二节 几种常用的层析法15

第四章　电泳技术21

第一节 电泳的基本原理21

第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳23

第二节 醋酸纤维素薄膜电泳23

第四节 以琼脂（糖）为支持物的电泳26

第五章　生物大分子的制备28

第一节 材料的选择和预处理28

第二节 细胞的破碎及细胞器的分离28

第三节 核酸的提取与纯化28

第四节 浓缩、干燥及保存30

第六章　DNA体外重组33

第七章　聚合酶链式反应（PCR）40

第一节　PCR实验室的要求40

第二节　PCR原理41

第三节　PCR在临床医学中的应用44

第八章　核酸分子杂交46

第三篇 生物化学及分子生物学实验53

实验一　微量凯氏（Kjeldahl）定氮法测定蛋白质含量53

实验二　Lowry氏法测定蛋白质含量55

实验三　双缩脲法测定蛋白质含量57

实验四　紫外吸收法测定蛋白质含量58

实验五　碱性磷酸酶（AKP）的分离及Km值的测定60

实验六　温度、酸碱度、抑制剂、激活剂对酶促反应的影响65

实验七　氨基酸薄层层析67

实验八　凝胶柱层析分离血红蛋白和DNP-胰糜蛋白酶68

实验九　血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳70

实验十　血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳72

实验十一　聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶74

实验十二　血清γ-球蛋白的分离与纯度鉴定78

实验十三　邻甲苯胺法测定血糖浓度80

实验十四　葡萄糖氧化酶法测定血糖82

实验十五　饥饿和饱食对肝糖原含量的影响83

实验十六　血清谷丙转氨酶活性测定（改良Mohun法）85

实验十七　血清甘油三酯含量测定86

实验十八　血清总胆固醇含量测定89

实验十九　酮体的生成及其定性91

实验二十　血清钙、磷测定93

实验二十一　酵母细胞核酸的提取和定量96

实验二十二　真核细胞中基因组DNA的提取和鉴定98

实验二十三　真核细胞总RNA的提取和鉴定100

实验二十四　大肠杆菌感受态细胞的制备及转化101

实验二十五　质粒DNA的提取及纯化103

实验二十六　DNA的琼脂糖凝胶电泳105

实验二十七　DNA重组与筛选109

实验二十八　PCR基因扩增111

实验二十九　Southern杂交分析112

实验三十　Northern杂交分析115

附录　常用缓冲液的配制117