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第一篇 细胞生物学技术在过敏反应学中的应用3

第1章 过敏反应相关细胞的分离、纯化、培养、鉴定3

第一节 细胞分离、纯化、培养、鉴定的基本原理3

第二节 树突状细胞的分离、纯化、培养、鉴定13

第三节 T、B淋巴细胞的分离、纯化、培养、鉴定16

第四节 肥大细胞的分离、纯化、培养、鉴定21

第五节 嗜碱性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定27

第六节 嗜酸性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定32

第七节 中性粒细胞的分离、纯化、培养、鉴定37

第八节 单核/巨噬细胞的分离、纯化、培养、鉴定42

第九节 上皮细胞的分离、纯化、培养、鉴定46

第十节 内皮细胞的分离、培养、纯化、鉴定52

第十一节 呼吸道平滑肌细胞的分离、纯化、培养、鉴定57

第十二节 成纤维细胞的分离、纯化、培养、鉴定63

第十三节 干细胞的培养67

第十四节 细胞的冻存与复苏69

第十五节 神经胶质细胞的分离、纯化、培养、鉴定78

第十六节 血小板的分离、纯化、培养、鉴定84

参考文献87

第2章 过敏反应相关的细胞功能实验94

第一节 肥大细胞激发实验94

第二节 嗜碱性粒细胞激发实验100

第三节 黏液分泌细胞刺激实验102

第四节 T、B细胞激发实验105

第五节 树突状细胞激发实验121

第六节 内皮细胞激发实验128

第七节 成纤维细胞激发实验132

第八节 神经胶质细胞激发实验134

第九节 细胞趋化性和细胞膜通透性实验138

第十节 细胞增殖实验144

第十一节 呼吸道平滑肌激发、收缩实验148

第十二节 细胞凋亡实验154

参考文献160

第3章 细胞成分的标记和检测165

第一节 常用组织和细胞取材及固定方法165

第二节 组织切片的制备177

第三节 组织化学染色190

第四节 免疫组织化学染色197

第五节 免疫组织化学双重或多重标记203

第六节 酶-底物染色209

第七节 原位杂交染色220

第八节 免疫胶体金染色229

第九节 激光共聚焦显微镜技术234

第十节 流式细胞术239

第十一节 细胞内钙离子水平测定247

第十二节 鉴定细胞信号转导通路的常用技术253

参考文献260

第二篇 生物化学与分子生物学技术在过敏反应学中的应用第4章 过敏反应相关的蛋白质纯化技术267

第一节 过敏原蛋白质组分的提取与制备267

第二节 蛋白质电泳技术276

第三节 点杂交和免疫印迹282

第四节 蛋白质的分离与纯化289

第五节 蛋白质浓度测定306

第六节 蛋白酶活性测定312

第七节 蛋白质一级结构的测定方法316

第八节 蛋白质的分子质量测定323

第九节 过敏原生物学功能鉴定332

第十节 表面等离子体共振技术336

参考文献340

第5章 过敏反应相关的分子生物学技术344

第一节 常规分子生物学技术344

第二节 普通PCR及荧光定量PCR技术355

第三节 重组蛋白表达与纯化365

第四节 细胞转染373

第五节 cDNA文库的建立377

第六节 Northern blot和Southern blot382

第七节 反义RNA技术391

第八节 RNA干扰技术393

第九节 表位确定404

第十节 限制性片段多态性技术、单链型多态性技术、单核苷酸多态性技术417

第十一节 点突变技术在低过敏原性疫苗中的应用424

第十二节 MicroRNA技术429

参考文献433

第三篇 蛋白质组学与生物信息学在过敏反应学中的应用第6章 蛋白质组学技术及在过敏反应学中的应用443

第一节 过敏原蛋白质组分的双向电泳分离技术443

第二节 过敏原蛋白质的质谱分析和鉴定技术467

第三节 过敏原蛋白质组学研究的策略与方法488

参考文献493

第7章 生物信息学在过敏原研究中的应用497

第一节 生物信息学的主要研究内容497

第二节 生物信息学在过敏反应学中的应用500

参考文献506

第四篇 抗体技术在过敏反应学中的应用511

第8章 抗体制备511

第一节 抗体制备的目的及基本原理511

第二节 多克隆抗体制备514

第三节 单克隆抗体制备518

第四节 抗体的纯化与鉴定525

参考文献534

第9章 基因工程抗体535

第一节 抗体工程535

第二节 抗体的修饰和标记541

参考文献546

第五篇 过敏反应相关的动物实验模型549

第10章 哮喘相关的动物实验模型549

第一节 豚鼠支气管哮喘模型549

第二节 小鼠支气管哮喘模型551

第三节 大鼠支气管哮喘模型555

第四节 狗哮喘模型557

第五节 灵长类哮喘模型558

第六节 猫哮喘模型561

第七节 兔哮喘模型564

第八节 绵羊哮喘模型565

参考文献566

第11章 过敏性鼻炎相关的动物实验模型569

参考文献575

第12章 其他动物实验模型577

第一节 大鼠足跖肿胀模型577

第二节 大白鼠皮肤毛细血管通透性模型578

第三节 小白鼠腹腔炎症性细胞浸润模型580

第四节 大白鼠皮肤炎症性细胞浸润模型584

第五节 实验性过敏性脑脊髓炎模型588

第六节 过敏性肠炎模型592

参考文献595

第六篇 临床相关的过敏反应学实验技术601

第13章 体液或培养液中特异性成分的测定601

第一节 组胺水平测定601

第二节 酶联免疫吸附测定604

第三节 酶联免疫斑点法613

第四节 放射免疫分析法615

第五节 ImmunoCAP系统620

第六节 血清食物特异性IgG的检测624

第七节 白三烯测定626

第八节 过敏性皮炎模型632

第九节 皮肤斑贴实验634

参考文献640

第14章 吸入性过敏原的收集与鉴定644

第一节 吸入性过敏原的收集644

第二节 吸入性过敏原的鉴定652

参考文献656

第15章 食入性过敏原的收集与鉴定657

第一节 食入性过敏原的收集657

第二节 食入性过敏原的鉴定660

参考文献661

中英文索引663