图书介绍

基因工程实验技术教程【2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载】

詹亚光，范桂枝，曾凡锁主编著
出版社：哈尔滨：东北林业大学出版社
ISBN：7810769901
出版时间：2007
标注页数：120页
文件大小：22MB
文件页数：127页
主题词：基因－遗传工程－实验－教材

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图书目录

1 核酸的制备2

1.1 DNA的制备3

实验1-1-1 植物基因组DNA的提取4

实验1-1-2 DNA溶液的纯化和浓缩6

1.2 RNA的制备8

实验1-2-1 基因组总RNA的提取9

实验1-2-2 mRNA的分离和纯化12

1.3 质粒DNA的制备14

实验1-3-1 质粒DNA的提取14

1.4 λ噬菌体DNA的制备20

实验1-4-1 λ噬菌体的培养20

实验1-4-2 λ噬菌体DNA的提取22

2 DNA重组体的构建24

2.1 目的基因的获取24

实验2-1-1 cDNA文库的构建25

实验2-1-2 PCR扩增分离目的DNA片段29

实验2-1-3 RT-PCR扩增获取目的基因32

实验2-1-4 功能基因 cDNA 3′末端及5′末端的克隆34

2.2 载体DNA与目的DNA片断的限制性内切酶酶切39

实验2-2-1 限制性内切酶的酶切与鉴定40

2.3 载体与目的基因的连接43

实验2-3-1 载体与目的基因的连接46

实验2-3-2 PCR产物与T载体连接49

2.4 重组子的转化52

实验2-4-1 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化52

实验2-4-2 醋酸锂法转化酵母细胞54

实验2-4-3 噬菌体转导55

2.5 重组质粒的鉴定58

实验2-5-1 α互补法筛选重组子58

3 克隆基因的体外表达与分析61

实验3-1 外源基因在原核细胞中的表达62

实验3-2 外源基因在酿酒酵母表达系统中的表达66

实验3-3 体外转录和翻译偶联检测法68

实验3-4 表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析73

实验3-5 Western免疫印迹76

4 林木基因工程实验技术79

4.1 组织培养再生体系的建立79

实验4-1-1 愈伤组织的诱导81

实验4-1-2 不定芽的分化83

实验4-1-3 壮苗和生根培养85

4.2 欧美山杨遗传转化体系的建立86

实验4-2-1 抗生素的敏感性实验86

实验4-2-2 农杆菌介导的欧美山杨杂种的遗传转化89

实验4-2-3 超声波介导的转化91

4.3 转基因植株的检测92

实验4-3-1 Gus活性检测92

实验4-3-2 转基因植株目的基因的PCR检测94

实验4-3-3 Southern印迹杂交检测外源基因的整合96

实验4-3-4 半定量RT-PCR检测99

实验4-3-5 Northern杂交技术101

附录1 核酸及蛋白质常用数据105

附录2 常用酶的配制107

附录3 常用抗生素溶液的配制方法108

附录4 常用贮存液的配制109

附录5 常用缓冲液的配制112

附录6 常用细菌培养基的配制116

附录7 常用的农杆菌培养基成分118

附录8 常用树木组织培养基的配制119

主要参考文献120