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第一章 概述1

第二章 果斑病菌生物学和病害流行规律研究11

一、果斑病菌种群结构和遗传多样性分析11

（一）采用多位点序列分型法（MultiLocus sequence typing,MLST）11

（二）hrp基因簇上的基因序列差异13

二、果斑病菌寄主范围和寄主抗性研究14

（一）果斑病菌寄主范围14

（二）寄主抗性研究15

三、果斑病菌侵染规律及病害发生流行条件研究16

（一）证实hrcR基因功能的缺失不影响果斑病菌在寄主体内的定殖和扩展16

（二）初步证实A.citrulli可以造成寄主系统性侵染18

（三）明确了高温有利于病原菌在甜瓜植株体内的定殖和扩展20

四、田间病害初侵染来源及病菌传播扩散动态研究23

（一）明确来源于杂草及水稻上的噬酸菌可能成为田间初侵染来源23

（二）明确T4SS及T6SS的相关基因分别影响果斑病菌从种子到种苗的传播24

（三）明确了T2SS对果斑病菌侵染定殖的影响32

（四）明确了果斑病菌侵染对西瓜子叶蛋白表达的影响36

（五）甜瓜细菌性果斑病病原菌花粉管传播途径研究37

五、西瓜根部和叶部的侵染定殖及定殖动态38

（一）福建省果斑病病原菌的分离鉴定38

（二）绿色荧光蛋白基因标记果斑病菌38

（三）红色蛋白基因标记果斑病菌40

（四）标记菌株在西瓜体内的侵染过程41

（五）标记菌株在西瓜体内的定殖动态研究43

六、不同管理模式对果斑病田间病害发生的影响研究45

（一）不同肥水管理对病害发生的影响45

（二）不同灌水模式对果斑病发生的影响46

七、病菌在新疆昌吉和甘肃金塔两个地区的土壤中越冬研究47

（一）模拟土壤郑州越冬后西瓜噬酸菌的存活和致病性检测47

（二）两个制种基地带菌土壤越冬后的存活和致病性检测48

八、西瓜甜瓜生物胁迫下用于基因表达分析的内参基因筛选49

第三章 果斑病菌致病机制解析51

一、果斑病菌群体感应基因的功能研究51

（一）群体感应基因luxR、luxI缺失突变体的构件及表型测定51

（二）luxR/luxI群体感应系统对相关毒性基因表达量的影响60

（三）群体感应信号物质的鉴定及功能研究61

二、果斑病菌突变体库的构件及致病相关基因功能研究64

（一）果斑病菌Tn5突变体库的构建及相关基因的功能研究64

（二）果斑病菌果胶裂解酶AcPel蛋白结构和致病性研究70

（三）果斑病菌Ⅲ型分泌系统及tatB基因的克隆与功能研究71

（四）一株西瓜果斑病菌的全基因组测序96

第四章 瓜类细菌性果斑病菌检测技术98

一、生物学特性98

二、理化特性101

三、温室试种检测法102

四、免疫学检测技术103

五、分子检测技术104

（一）PCR及实时荧光PCR检测104

（二）果斑病LAMP检测方法108

（三）果斑病菌交叉引物扩增技术111

六、果斑病菌活体检测方法114

（一）PMA对活菌影响研究114

（二）PMA对死菌扩增的抑制作用研究115

第五章 西瓜甜瓜种子生产中细菌性果斑病防治关键技术研究与应用117

一、带菌亲本种子对后代种子带菌的影响研究117

（一）材料与方法117

（二）带菌亲本种子对制种地种子细菌性果斑病发生的关系118

二、种田不同栽培密度、灌溉方式及采种技术、采种工具下西瓜甜瓜细菌性果斑病发生情况及种子带菌率研究119

（一）材料与方法119

（二）种田不同栽培密度、不同灌溉方式及不同采种技术、采种工具下西瓜甜瓜细菌性果斑病发生情况及种子带菌率研究121

三、种子干热处理和种子化学处理效果评估121

（一）材料与方法121

（二）种子干热处理123

四、几种种子处理剂对瓜类细菌性果斑病防治效果的研究125

（一）材料与方法125

（二）结果与分析125

五、果斑病化学药剂防治试验研究128

（一）材料与方法128

（二）细菌性果斑病化学药剂防治研究129

六、示范基地建设、应用推广及技术培训130

（一）出版发行西瓜甜瓜健康种子生产技术多媒影视专题片130

（二）标准化示范基地建设130

（三）西瓜甜瓜健康种子生产技术培训131

第六章 西瓜甜瓜种子采后处理技术研究与示范133

一、建立了湖南地区瓜类细菌性果斑病种子消毒评价体系134

二、不同消毒处理方法对提高种子健康的效果研究134

（一）通过室内培养基杀菌试验和带菌种子消毒处理得到几种有效的种子杀菌剂134

（二）干热灭菌处理提高种子健康137

（三）辐射处理提高种子健康140

（四）利用发芽率和发芽势评价种子处理安全性141

（五）“四霉素”的筛选141

（六）自然带菌种子消毒方法筛选142

（七）建立了一种高效节水的种子处理方法143

（八）通过种子采收后发酵、快速干燥等处理提高种子健康143

三、“1号杀菌剂”防治瓜类细菌性果斑病144

（一）抑菌效果144

（二）1号杀菌剂毒力分析145

（三）带菌种子处理145

（四）喷雾浓度试验结果148

（五）温室喷雾防治结果148

（六）应用1号杀菌剂控制西瓜甜瓜果斑病发生的研究结论和分析148

四、1号杀菌剂对三倍体西瓜种子的消毒处理研究149

（一）药剂处理对种子发芽势的影响149

（二）药剂处理对种子根长的影响150

（三）带菌种子药剂处理后消毒效果150

（四）带菌西瓜种子药剂处理后成苗率及防治效果152

五、建立了一种三倍体西瓜种子消毒技术153

（一）通过种子引发处理提高三倍体西瓜种子活力153

（二）建立了三倍体西瓜种子采后处理方法—有效杀菌剂与固体基质引发结合153

（三）三倍体西瓜种子消毒技术的形成及初步田间种植试验效果156

六、种子包衣处理提高种子健康156

七、通过引发处理全面提高种子活力156

（一）建立了西瓜种子引发技术体系，全面提高种子活力156

（二）西瓜种子引发效果可以保持二年以上157

（三）提高西瓜生产配套砧木种子引发技术的研究与应用158

八、种子配套技术配套设备研制与应用160

九、小结161

第七章 西瓜甜瓜嫁接苗安全生产技术研究与示范163

一、砧木和接穗种子带菌与嫁接苗细菌性果斑病发生关系的研究163

（一）带菌接穗种子与西瓜幼苗BFB发生的关系分析163

（二）带菌砧木种子与砧木幼苗BFB发生的关系分析164

（三）带菌砧木幼苗与西瓜嫁接苗BFB发生的关系分析165

（四）瓜类细菌性果斑病菌在葫芦幼苗中定殖的观察165

（五）用GFP标记菌株观察BFB病原菌Ac在砧木叶片的定殖166

（六）BFB在不同病害等级葫芦砧木中侵染情况166

（七）在嫁接后育苗管理中BFB带菌苗的传染情况167

（八）嫁接苗成活后BFB在接穗子叶的发生情况168

（九）BFB在不同病害等级西瓜接穗中侵染情况168

（十）在嫁接后环境管理中BFB带菌西瓜接穗的传染情况169

（十一）再侵染途径中BFB病菌对西瓜嫁接苗的影响169

（十二）再侵染途径中BFB病菌对西瓜嫁接苗发病率的影响170

（十三）西瓜甜瓜嫁接苗细菌性果斑病识别技术档案170

二、带菌嫁接用具及育苗基质与西瓜嫁接苗BFB发生间的关系分析171

（一）竹签接菌浓度与西瓜嫁接苗BFB发生的关系171

（二）带菌竹签嫁接与西瓜嫁接苗BFB发生的关系172

（三）带菌育苗基质与西瓜幼苗BFB发生间的关系173

三、不同嫁接方法与西瓜嫁接苗BFB发生间的关系173

四、嫁接环境因子与西瓜甜瓜嫁接苗细菌性果斑病发生关系研究174

（一）不同温度环境中葫芦砧木发病情况试验174

（二）不同湿度条件下葫芦砧木发病情况试验175

五、不同灌溉方式与西瓜甜瓜嫁接苗细菌性果斑病的发生关系研究177

六、西瓜甜瓜嫁接苗细菌性果斑病的防治技术研究178

（一）化学药剂的室内抑菌和杀菌试验178

（二）带菌接穗种子药剂处理技术研究180

（三）带菌竹签、带菌基质的消毒技术研究181

（四）西瓜甜瓜嫁接苗化学药剂处理的田间小区试验183

七、HACCP体系在嫁接苗BFB综合防控中的应用183

（一）西瓜嫁接育苗生产工艺流程183

（二）西瓜嫁接育苗过程中BFB的危害识别及关键控制点的确定184

（三）西瓜嫁接育苗过程中BFB危害分析与识别184

（四）西瓜嫁接育苗过程中BFB防治的关键控制点185

（五）西瓜嫁接育苗过程中BFB防治的监管监控计划186

（六）嫁接育苗标准的制定与推广应用187

八、举办了两次《全国西瓜甜瓜嫁接苗集约化生产观摩与研讨会》和《国际同艺学会第一届蔬菜嫁接研讨会》187

九、小结188

第八章 西瓜甜瓜细菌性果斑病综合防控关键技术集成与示范189

一、细菌性果斑病的品种抗性监测189

（一）规范病情分级标准189

（二）栽培方式对病害发生的影响189

（三）病害发生动态及品种抗病性调查190

（四）设施甜瓜环境监测数据的采集191

二、环境友好型药剂筛选191

三、西瓜甜瓜细菌性果斑病防治新药剂——溴硝醇194

（一）活体组织法筛选防治甜瓜细菌性果斑病药剂194

（二）甜瓜细菌性果斑病活体盆栽药剂筛选194

（三）溴硝醇80％可溶性粉剂对甜瓜细菌性果斑病的防治效果195

（四）60％溴硝醇可溶性粉剂对甜瓜细菌性果斑病的防治效果196

（五）种子处理技术197

（六）甜瓜细菌性果斑病种子处理剂开发199

（七）50％溴硝醇湿拌种剂的示范推广199

四、生防菌株的筛选200

五、药剂浸种对果斑病发生的影响201

六、诱抗剂对果斑病防治试验201

七、果斑病菌抑菌化合物高通量筛选体系的构建203

八、两种新型果斑病菌抑制剂203

九、黑曲霉发酵液Y-1对BFB防效评估204

（一）黑曲霉发酵液平板抑菌效果评估204

（二）发酵液处理带菌葫芦种子不同时间后幼苗发病情况205

（三）黑曲霉发酵液诱导抗性研究206

十、标准化综合防控技术的防控效果206

十一、综合防控技术的集成207

十二、综合防控技术的示范推广和专家评价207

十三、小结209

主要参考文献210