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第一篇 生物化学实验技术原理1

第一章 电泳技术1

第一节 概述1

第二节 电泳的基本原理2

第三节 区带电泳技术7

第四节 染色方法26

第二章 层析技术31

第一节 概述31

第二节 层析技术的基本理论33

第三节 层析定性与定量分析41

第四节 常用的层析方法44

第三章 分光光度法57

第一节 概述57

第二节 光吸收的基本规律60

第三节 分光光度计的构造和类型61

第四节 定性、定量方法及其应用64

第五节 双波长分光光度计及其测定方法66

第四章 超离心技术70

第一节 概述70

第二节 超离心分离方法75

第三节 密度梯度液的制备和区带收集79

第四节 制备超离心机作沉淀分析84

第五章 生物大分子的分离纯化与鉴定85

第一节 生物大分子制备的前处理85

第二节 分离纯化87

第三节 生物大分子的浓缩、干燥和保存88

第四节 生物大分子含量的测定和纯度鉴定90

第二篇 基础验证性实验92

实验一 血浆蛋白质乙酸纤维薄膜电泳92

实验二 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳94

实验三 血清总蛋白的测定及标准曲线的制作（双缩脲法）95

实验四 蛋白质定量测定Folin-酚试剂法97

实验五 血清丙氨酸氨基转移酶（S-ALT）活性测定99

实验六 动物组织DNA的提取和鉴定102

实验七 肝糖原的提取鉴定与定量104

实验八 运动后血中乳酸含量的变化105

实验九血清总胆固醇测定（磷硫铁法）108

实验十 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制109

实验十一 氨基酸的薄层层析110

实验十二 氨基酸双向纸层析111

实验十三 凝胶层析分离血红蛋白与CuSO4114

实验十四 胡萝卜素的柱层析分离115

实验十五 血清尿素氮的测定116

实验十六3H-胸苷掺入DNA的实验118

实验十七32P掺入磷脂的实验119

实验十八 血红蛋白及其衍生物的吸收光谱测定121

实验十九 核酸溶液的紫外吸收测定122

实验二十 蛋白质溶液的紫外吸收测定123

实验二十一 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦分离血清蛋白质125

实验二十二 血清脂蛋白快速超离心分离实验127

实验二十三 密度梯度离心法分离肝细胞器128

实验二十四 细胞色素c的制备和含量测定130

实验二十五 固定化具有葡萄糖异构酶活性菌体的制备132

实验二十六 亲和层析法纯化胰蛋白酶133

实验二十七 胰酶的活性测定136

第三篇 综合性实验138

综合性实验一 影响酶活性的因素及酶促反应速度与时间的关系138

综合性实验二 血清白蛋白、γ-球蛋白的分离纯化及鉴定146

综合性实验三 Cu·Zn超氧化物歧化酶的分离、纯化及活性、稳定性测定149

综合性实验四 SDS-PAGE分离蛋白质、血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳154

综合性实验五 动物组织RNA的提取和鉴定160

综合性实验六 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶（LDH）同工酶163

第四篇 创新性实验168

创新性实验一 外周血DNA的提取和鉴定168

创新性实验二 凝血酶的固定化及其稳定性测定171

创新性实验三 糖尿病的生化检测分析及胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响172

创新性实验四DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白质175

创新性实验五PBL教学法在《生物化学》课堂教学中的运用178

附录179

附录1生物化学实验的基本操作及原理179

附录2常用容量仪器的规格、使用、清洗及洗液的配制183

附录3化学试剂的规格与保管187

附录4实验室常用设备介绍188