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第一章 概述1

一、医学免疫学实验的目的和要求1

二、医学免疫学实验室规则1

第一篇 基础性实验3

第二章 特异性抗体的制备3

实验1 免疫血清的制备3

实验2 免疫血清的鉴定及纯化5

附：免疫血清的保存9

实验3 单克隆抗体的制备9

第三章 凝集反应14

实验4 直接凝集反应14

一、玻片凝集反应14

二、试管凝集反应15

实验5 间接凝集抑制试验17

第四章 沉淀反应20

实验6 单向免疫扩散试验20

实验7 双向免疫扩散试验22

实验8 对流免疫电泳试验24

第五章 补体参与的反应26

实验9 补体的溶血反应26

实验10 血清总补体活性测定27

实验11 补体依赖的细胞毒试验29

附：HLA血清学分型法30

第六章 免疫标记技术33

实验12 免疫荧光技术33

实验13 酶联免疫吸附试验35

实验14 酶联免疫斑点试验38

实验15 发光免疫标记技术40

实验16 免疫印迹技术42

第七章 免疫细胞的分离与纯化46

实验17 人外周血单个核细胞的分离46

实验18 小鼠腹腔巨噬细胞的分离48

实验19 小鼠脾细胞的制备49

实验20 小鼠胸腺细胞的制备50

实验21 小鼠骨髓树突状细胞的制备51

附：人树突状细胞的制备53

第八章 免疫实验相关动物模型的制备54

实验22 免疫功能低下动物模型的建立54

实验23 荷瘤动物模型的建立55

第二篇 综合性实验57

第九章 免疫细胞检测57

实验24 E花环形成试验57

附：绵羊红细胞（SRBC）悬液的配制59

实验25 T淋巴细胞亚群的测定59

一、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶免疫细胞化学法（APAAP法）59

二、流式细胞术检测法61

实验26 淋巴细胞增殖试验62

一、形态学方法62

二、3H-TdR掺入法64

三、MTT比色法65

实验27 混合淋巴细胞培养66

实验28 NK细胞杀伤活性测定67

实验29 中性粒细胞吞噬功能测定68

实验30 硝基四氮唑蓝还原试验70

实验31 巨噬细胞吞噬功能测定71

实验32 巨噬细胞趋化试验72

实验33 溶血空斑形成试验74

实验34 细胞因子的检测76

一、白细胞介素-2的诱生与生物学活性检测77

二、肿瘤坏死因子的免疫学检测法80

第十章 超敏反应的免疫学检测82

实验35 豚鼠过敏反应观察82

实验36 皮肤过敏反应试验83

附：其他常用皮试液的配制84

实验37 皮肤迟发型超敏反应试验84

实验38 血清总IgE测定86

第三篇 设计性实验89

第十一章 设计性实验的选题、设计与实施89

一、设计性实验的选题89

二、实验设计的内容及步骤90

三、设计性实验的组织实施91

四、实验论文的撰写92

五、论文答辩93

六、设计性实验举例93

第十二章 设计性实验参考选题96

参考选题1 细胞因子对荷瘤小鼠免疫功能的影响96

参考选题2 多糖类免疫调节剂对正常或免疫功能低下小鼠免疫功能的影响96

参考选题3 肿瘤患者细胞免疫功能测定97

参考选题4 自身免疫病患者免疫功能状态的测定98

参考选题5 新型免疫细胞亚群的分析99

附录Ⅰ 免疫学研究常用实验动物及基本操作技术100

一、实验动物的作用与意义100

二、免疫学实验常用动物100

三、实验动物的抓取与固定101

四、实验动物给药方法102

五、实验动物采血方法103

附录Ⅱ 免疫学实验常用仪器设备及使用方法105

一、倒置显微镜105

二、荧光显微镜106

三、分光光度计108

四、电泳仪111

五、超速离心机112

六、超净工作台113

七、液体闪烁计数仪114

八、流式细胞仪115

附录Ⅲ 免疫学实验常用器材及使用方法117

一、试管117

二、微量移液器117

三、微型离心管119

四、滤过器120

附录Ⅳ 免疫学实验常用试剂及配制方法122

一、缓冲液122

二、培养液126

三、ELISA试剂128

四、其他试剂溶液128

附录Ⅴ 离心机转子的转速与相对离心力RCF（g）间的换算关系130

一、相对离心力（RCF）计算法130

二、离心转速（r/min）计算法130

三、相对离心力列线图130

参考文献133